植物核DNA大量提取试剂盒操作步骤

产品说明:

      改进的经典CTAB植物DNA抽提液内（添加多种针对植物特点的多糖、多酚去除成份）迅速裂解细胞和灭活细胞内核酸酶，lv仿抽提后通过离心清除多糖、多酚和蛋白，然后基因组DNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜， 再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤, 进一步将多糖，多酚和细胞代谢物，蛋白等杂质去除， zui后低盐的洗脱缓冲液将纯净基因组DNA从硅基质膜上洗脱。

 

注意事项:

◆   所有的离心步骤均在室温完成，使用离心力可以达到10，000×g的高速离心机。

◆   开始实验前将需要的水浴先预热到65℃备用。

◆   需要自备β-巯基乙醇。

◆   Buffer P3 和HB buffer中含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤，眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。

◆   不同来源的植物组织材料中提取的DNA 的量会有差异，一般1g新鲜组织典型产量可达30-250μg。

◆   洗脱液EB不含有螯合剂EDTA, 不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗脱，但应该确保PH大于7.5, PH过低影响洗脱效率。用水洗脱DNA应该保存在-20℃。DNA如果需要长期保存，可以用TE缓冲液洗脱（10mM Tris-HCl， 1mM EDTA，PH 8.0），但是EDTA可能影响下游酶切反应，使用时可以适当稀释。

试剂盒特点:

◆   离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。

◆   不需要使用有毒的苯酚等试剂，也不需要乙醇沉淀等步骤。

◆   快速，简捷，单个样品操作一般可在1小时内完成。

◆   数种去多糖、多酚成份和多次柱漂洗确保高纯度，OD260/OD280典型的比值达1.7～1.9，长度可达30Kb-50kb，可直接用于PCR，Southern-blot和各种酶切反应。