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细胞角蛋白20抗体操作步骤

268 人阅读发布时间:2020-11-16 11:23

【产品名称】:细胞角蛋白20抗体CK20
【规    格】:0.1ml/0.2ml
【相关标记】:Alexa Fluor 350   Alexa Fluor 488   Alexa Fluor 555   Alexa Fluor 647   AP   APC   Biotin   Cy3   Cy5   Cy5.5   Cy7   FITC   Gold   HRP   PE   PE-Cy3   PE-CY5   PE-CY5.5   PE-CY7   RBITC
【浓    度】:1mg/1ml
【抗体来源】:Rabbit or Mouse or Goat(咨询,)
【克隆类型】:polyclonal or monoclonal
【产品类型】:一抗
【性    状】:Lyophilized or Liquid
【亚    型】:IgG
【纯化方法】:affinity purified by Protein A
【储 存 液】:0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
【产品应用】:not yet tested in other applications.optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
【保存条件】: Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C.


抗体交联法:
⑴ 以0.3Mol/L pH 9.5硼酸盐缓冲液将铁蛋白稀释成20mg/ml~25mg/ml。
⑵ 以1︰1000(W/W)的比例加入XC液室温搅拌45min,离心去沉淀。
⑶ 以0.3Mol/L pH 9.5硼酸盐缓冲液将提纯lgG配成5mg/ml,以1︰4的比例(V/V)加入IgG与铁蛋白-XC液,4℃搅拌48h。
⑷ 以0.1Mol/L碳酸铵溶液透析过夜,以除去多余的异氰酸盐,再以0.05Mol/l pH 7.5 PBS透析,使pH值恢复到生理水平。
⑸ 超速离心 以1.00×105g离心5h,去上清,沉淀以0.05Mol/L PBS悬浮,再次离心,以除去未结合的IgG。
⑹ 以血清学及免疫学方法测定结合抗体的特异性、免疫活性以及标记效应,如果操作步骤严格,结果是满意的。


结果判定:
抗体的主要功能是与抗原(包括外来的和自身的)相结合,从而有效地清除侵入机体内的微生物、寄生虫等异物,抗体(antibody)是一种应答抗原产生的、可与抗原特异性结合的蛋白质。每种抗体与特定的抗原决定基结合。这种结合可以使抗原失活,也可能无效但有时也会对机体造成病理性损害,如抗核抗体、抗双链DNA抗体、抗甲状腺球蛋白抗体等一些自身抗体的产生,对人体可造成危害。
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