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HEPES解离液使用说明

1171 人阅读发布时间:2020-12-21 11:13

名称:HEPES解离液
产品规格:500ml
分类:细胞组分分离
储存条件:4℃,6个月
用途:分离细胞核。
注意事项:主要由HEPES、硫酸镁、氯-化钾、dtt、等组成。。
使用范围:仅限科研使用,不能应用于临床。

HEPES是一种Good’s缓冲试剂,中文全称为N-2-羟乙基哌-嗪-N'-2-乙磺酸。它的PH缓冲范围在6.8到8.2区间之内。HEPES较难溶解于其他的任何溶剂,但很容易溶解于水,而且同多价的金属离子之间不会产生沉淀反应的现象。此外,大部分的自然因素都不会影响HEPES的解离作用,如温度、浓度、培养基盐分以及离子组成等等,由此可见HEPES稳定性非常好。

我们需要注意的是HEPES缓冲液使用的最终浓度为10-50mmol/L,因此它对细胞没有任何毒性。通常在一般情况下,HEPES的浓度为20mmol/L就可以达到缓冲能力。下面就HEPES缓冲液两种使用方法进行介绍:

第1种使用方法主要是HEPES根据所需要的一定浓度直接添加到已经配制完成的培养液中,然后经过过滤除菌的操作。在每一千毫升的培养液中加入2.38g的HEPES缓冲试剂,等到溶解之后使用1N的氢氧化钠调好PH值到7.2,在进行滤过除菌后才能正常使用。这时HEPES生物缓冲液的使用浓度为10mmol/L。

第二种使用方法通常在使用前取到99毫升的培养液,然后加入l毫升的贮存液,此时该溶液的应用浓度还是为10mmol/L。取23.8g HEPES溶于90ml双蒸水中,用1N的氢氧化钠调pH至7.5到8.0范围,开始用水定容至100ml,过滤除菌,分装2ml的小瓶,保存条件是4℃或-20℃。这就是l mol/L(100 x)HEPES贮存液配制的方法。

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