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丙酮酸脱羧酶(PDC)提取试剂实验步骤

506 人阅读发布时间:2021-03-18 11:59

名称:丙酮酸脱羧酶(PDC)提取试剂
产品规格:500ml
产品分类:细胞组分分离
储存条件:—20℃,避光,12个月
用途:主要用于裂解植物组织,提取样品中的丙酮酸脱羧酶(PDC)。

产品简介:
丙酮酸脱羧酶(Pyruvate decaboxylase,PDC)又称α-羧化酶,是一种作用于α-酮酸是的羧化酶。丙 酮酸脱羧酶(PDC)、乙醇脱氢酶(ADH)是乙醇发酵途径的关键酶,缺氧条件下二者均升高,PDC活性通常比ADH活性低,是乙醇合成的限速酶,无氧呼吸途径代谢产物的过程积累对细胞产生毒性,影响线粒体结构和三羧酸循环的相关酶活性。

丙酮酸脱羧酶(PDC)提取液主要用于裂解植物组织,提取样品中的丙 酮酸脱羧酶。该试剂仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。

自备材料:
1、蒸馏水
2、离心管或试管
3、匀浆器或研钵
4、低温离心机

操作步骤(仅供参考):
1、取植物组织清洗干净,切碎。
2、配制丙酮酸脱羧酶提取工作液:取出丙酮酸脱羧酶提取液和PMSF,恢复至室温,混合,混匀,即配即用,不易久置,否则蛋白酶抑制剂PMSF的效率会有所下降。
3、加入预冷的丙酮酸脱羧酶提取工作液,冰浴情况下充分匀浆或研磨。
4、留取上清液即为丙酮酸脱羧酶粗提液,保存,用于丙酮酸脱羧酶的检测或其他用途。

计算:组织或植物粗酶液获得率(ml)=上清液体积(ml)/组织或植物质量×100%

注意事项:
1、实验材料应尽量新鲜,如取材后不立即使用,应存于-20-80℃。
2、待测样品中不能含有磷酸酶抑制剂,同时需避免反复冻融。
3、所测样本的值高于标准曲线的上限,应用丙酮酸脱羧酶提取工作液稀释样品后重新测定。
4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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