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Lillie二价铁染色液操作步骤

525 人阅读发布时间:2021-08-09 16:14

中文名称:Lillie二价铁染色液
产品规格:2×50mL|2×100mL
用途:显示组织中的三价铁离子
注意事项:三价铁呈深普鲁士蓝,细胞核呈红色。
储存条件:室温,避光,12个月

产品概述:
含铁血黄素(Hemosiderin)是一种血红蛋白源性色素,为金黄色或棕黄色颗粒,因其含铁,且为金黄色,故称为含铁血黄素。当红细胞被巨噬细胞吞噬后,在溶酶体酶的作用下,血红蛋白被分解为不含铁的橙色血质和含铁的含铁血黄素。Perls普鲁士蓝反应(Prussian blue reaction)又称为含铁血黄素染色,即经过亚铁qing化钾和稀酸处理后可以产生蓝色,常见于吞噬细胞或间质内,主要显示三价铁盐。在极少数情况下,铁存在于其还原态的亚铁之中,Lillie法是显示二价铁的很好地的方法,其特异性较好。

自备材料:
1、系列乙醇
2、蒸馏水

操作步骤(仅供参考):
1、 组织固定于中性福尔马林或其他碱性固定液,常规脱水包埋。
2、 切片厚度,常规脱蜡至水。
3、 蒸馏水水洗。
4、 切片入Lillie stain (见注意事项4),浸染。
5、 蒸馏水充分冲洗。
6、 入核固红染色液,淡染细胞核。
7、 蒸馏水冲洗。
8、 常规脱水透明,中性树胶封固

染色结果:
二价铁   深藤氏蓝
细胞核、其他组织  红色

阴性对照(可选):取相同对照切片脱蜡至水。结果为阴性。

注意事项:
1、 该染色法适用于石蜡切片、冰冻切片和树脂切片,切片脱蜡应尽量干净。
2、 组织固定常采用10%中性福尔马林,经普通福尔马林长期固定后,组织会有损伤。避免使用酸性固定剂,铬酸盐处理也会妨碍铁的保存。
3、 整个操作过程中容器要干净,避免用金属铁制品,洗切片和容器时以蒸馏水为宜,因普通水内含铁质。
4、 Lillie stain染色时,应根据样本情况调整着色时间。  
5、 所有切片都应使用同一个阳性对照切片,选择适合的对照非常重要。尸检肺组织是一个很好的对照,包含相当数量的铁阳性巨噬细胞(心衰细胞)。
6、 系列乙醇应经常更换新液。
7、 冰冻切片和细胞的染色,最好根据具体情况摸索实验条件。
8、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 
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