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酸性L-G培养基基础配制方法

315 人阅读发布时间:2022-02-15 14:34

中文名:酸性L-G培养基基础
英文名称:Acid L-G Medium Base
产品规格:250g
用途:用于碱性物质处理的结核杆菌标本。

成分(g/ 600ml):
磷酸二氢钾 14.0
硫酸镁 0.24
柠檬酸镁  0.6
L-谷氨酸钠  7.2
孔雀绿  0.4
马铃薯淀粉  30.0

用法
称取本品 52.44g,并吸取甘油12ml,加热搅拌溶解于 600ml蒸馏水中,煮沸 5-10 分钟,121℃高压灭菌 15  分钟取出。待冷至55℃左右时,以无菌操作加入无菌搅匀的全蛋液 1000ml,混匀 ( 避免产生气泡 ),分装18 mm × 180mm 试管,每管 7ml,置成长斜面 ,用 85 -  90℃流动蒸汽处理1-1.5小时后,取出放冷备用。

结核分枝杆菌(M.tuberculosis)简称为结核杆菌(tubercle bacilli),是人类结核病的病原体。结核分枝杆菌为细长略带弯曲的杆菌,大小1~4X0.4μm。牛分枝杆菌则比较粗短。分枝杆菌属的细菌细胞壁脂质含量较高,约占干重的60%,大量分枝菌酸(mycolic acid)包围在肽聚糖层的外面,可影响染料的穿入。分枝杆菌一般用齐尼(Ziehl-Neelsen)抗酸染色法,以5%石炭酸复红加温染色后可以染上,但用3%盐酸乙醇不易脱色。若再加用美蓝复染,则分枝杆菌呈红色,而其他细菌和背景中的物质为蓝色。本菌无芽孢、无鞭毛。

培养特性:专性需氧。最适温度为37℃,低于30℃不生长。结核分枝杆菌细胞壁的脂质含量较高,影响营养物质的吸收,故生长缓慢。结核菌在含氧40%~50%并有5%~10%CO2和温度为36℃±5℃,合适PH值为6.8~7.2的条件下生长旺盛。在一般培养基中每分裂1代需时18~24小时,营养丰富时只需5小时。
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