TBX培养基配制方法

英文名称：TBX培养基
英文名称：TBX Agar
供应商：远慕生物
产品规格：100g
保质期：二年
产品用途：用于快速、准确检测大肠杆菌，培养24小时，大肠杆菌显蓝绿色

TBX培养基是远慕生物公司改良的培养基，用于食品、水、牛奶、冰激凌和肉制品中大肠杆菌的快速检测。大肠杆菌显蓝绿色，大肠菌群显无色，其它菌显黄色或无色，革兰氏阳性菌被抑制。

成分（g/L）:
特殊营养物质  21.4 
显色剂  0.2 
琼脂  15.0 
PH6.8±0.2  25℃
此配方可以进行改良或增加营养成份以获得最/佳的结果。

用法：
称取本品36. 6g加入1000ml蒸馏水，加热溶解并不停搅拌，煮沸不要超过1分钟。分装三角瓶，121℃ 高压灭菌15分钟。取1ml制备好的样品液加入直径为9cm无菌平皿中心，倾入冷却至45- 50°C培养基约15ml，混匀，凝固后， 36士1℃倒置18~24h。或冷却至45°C-50°C时，倾入无菌平皿，琼脂完全凝固后， 在超净工作台中开盖吹15- 30分钟，去掉培养基表面水汽，加入适当稀释度的样品液1ml， 涂布于培养基上，36士1°C 培养18~24h。

检验原理：
特殊营养物质提供微生物生长所需的碳氮源和微量元素，维持均衡的渗透压，并提供针对革兰氏阳性细菌的选择性，特别是杆菌和粪链球菌；显色剂是由发色团和微生物部分可代谢物质组成，在特异性酶靶定作用下，游离出产色因子用于合成细胞使菌落显示颜色。在TBX培养基上，大肠杆菌菌落显蓝绿色，其它菌显黄色或无色。

操作步骤：
1、按国家标准、SN标准、FDA标准或其它方法制备样品液;
2、取样品液1ml加入冷却至45- -50°C 显色培养基中混匀或涂布于平板上;
3、36+1C培养18~24h,选用有30~~200个菌落的平板，计数平板上出现的典型大肠杆菌菌落。大肠杆菌典型菌落为蓝绿色，其它细菌为无色或黄色菌落。总大肠杆菌=蓝绿色菌落;
4、对可疑大肠杆菌菌落可划线接种到营养琼脂平板上, 36+1C 培养12- 16小时，挑取单菌落做大肠杆菌全套生化试验(远慕有生化鉴定管套装4种x4套)。

质量控制：
1、外观
此干燥培养基的粉末均匀，具有良好的流动性，呈乳白色。制备好的平板呈无色透明固体。
2 、微生物试验在 36 ±1℃ 培养18～24h小时:

质控菌株	ATCC	生长情况	菌落颜色
单增李氏菌	19114	-/+	无色
金黄色葡萄球菌	25923	-/+	无色
大肠杆菌	25922	+++	蓝绿色
沙门氏菌	14028	+++	无色
产气肠杆菌	35029	+++	无色
阴沟肠杆菌	23355	+++	无色

方法的局限性：
本培养基鉴定大肠菌群大肠杆菌，少数情况下可能会出现假阳性，但不会出现假阴性，有时可能需做其它补充试验。

典型特征：
大肠杆菌典型菌落为蓝绿色，大肠菌群为无色菌落，其它细菌为无色或黄色菌落。

贮存：
制备好的平板应立即使用，应避免光线直接照射。干燥培养基应放置于阴暗干燥处，保存温度2-8C，注意避光保存。

失效：
干燥培养基超过保质期、结块和颜色变化都不能使用。

注意：
此培养基仅供实验室使用。

TBX培养基的微生物灵敏度试验:
按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置36±1℃需氧培养18-24小时。
注：回收率计算时，用TSA琼脂做对照培养基。