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改良 Bielschowsky 神经染色液操作步骤

435 人阅读发布时间:2023-06-12 16:17

改良 Bielschowsky 神经染色液规格: 5×50ml保存: 4℃ 避光,有效期3个月。

 

产品内容:

名称

规格

Storage

试剂(A): Bielschowsky银溶液

50ml

4℃ 避光

试剂(B): 还原剂

2×125ml

RT

试剂(C): Bielschowsky氨银溶液

50ml

4℃ 避光

试剂(D): 氯化金溶液

50ml

4℃ 避光

试剂(E): 海波溶液

50ml

RT

 

 

 

产品说明:神经组织主要是由具有长突起、能传导冲动的神经细胞组成。神经细胞是神经系统的结构和功能单位,也称神经元(Neuron)。神经元之间通过突触互相联系。神经元的胞突分为树突与轴突两种。每个神经元有 1 至多个树突,轴突只有一个。神经纤维由从神经元发出的轴突和较长的树突以及包裹在外的构造一起组成。轴突中主要为神经原纤维和少量胞浆及线粒体,没有尼氏小体。轴突外周的构造,有些较为复杂,外层被鞘膜包裹,称为有髓纤维;有些比较简单,无鞘膜被覆,称为无髓纤维。神经元和神经纤维的染色方法较多,但主要为镀银法。镀银法的基本原理是把固定后的组织或切片浸于银溶液中,再用还原剂处理,使银颗粒沉着于轴索的轴浆中,使之呈现深棕色或黑色。镀银后可在神经元胞浆内看到许多交错成网的细丝,并伸入树突及轴突之中。Bielschowsky 银染法是检测神经纤维的一个非常有用方法。它可用于中枢神经系统的轴突、神经纤维和老年斑的染色。该方法简便易行,常被用于阿尔茨海默症的染色。

 

操作步骤(仅供参考):

1、 石蜡切片厚 8~15μm,脱蜡至水洗。

2、 蒸馏水洗 1~2min。

3、 于 37℃温箱内入 Bielschowsky 银溶液避光浸染 25~35 min。

4、 蒸馏水洗 2~3min。

5、 用还原剂还原数秒,至切片呈现黄色为止。

6、 蒸馏水洗 3~5 min。

7、 用 Bielschowsky 氨银溶液滴染 20~40s。

8、 倾去染液,直接用还原剂再次还原 1~2min,更换两次溶液,使切片呈棕黄色。

9、 蒸馏水洗 3~5min。

10、 用氯化金溶液调色 3~5min。

11、 蒸馏水洗 1~2min。

12、 用海波溶液固定 3~5min。

13、 水洗 3~5min,然后用滤纸将切片周围水分吸干。

14、 无水乙醇脱水,二甲苯透明,中性树胶封固。

染色结果:神经元、轴突、神经纤维 深紫色至黑色

 

注意事项:

1、 所用的玻璃器皿要用酸洗,并用蒸馏水冲洗干净,避免造成银镜反应。

2、 浸银染色中过程中切片要注意展平避免皱褶,以免着色不均匀。

3、 建议每染色 10-15 张切片后更换新的染色液。

4、 切片染完后,裱片时要轻拿轻放,以免弄碎切片。

5、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
 

 

资料格式:

YM改良Bielschowsky染色液说明书-带logo.docx

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