人复合前列腺特异性抗原(CPSA)ELISA试剂盒应用方法

人复合前列腺特异性抗原(CPSA)ELISA试剂盒
本试剂仅供研究使用

试验原理：
CPSA试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知CPSA浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将CPSA物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中CPSA的活性浓度呈比例关系。

人复合前列腺特异性抗原(CPSA)ELISA试剂盒试剂盒内容及其配制
试剂盒成份（2-8℃保存）    96孔配置    48孔配置    配制
96/48份酶标板    1块板（96T）    半块板（48T）    即用型
塑料膜板盖    1块    半块    即用型
标准品：400ng/ml    1瓶（0.6ml）    1瓶（0.3ml）    按说明书进行稀稀
空白对照    1瓶（1.0ml）    1瓶（0.5ml）    即用型
标准品稀释缓冲液    1瓶（5ml）    1瓶（2.5ml）    即用型
生物素标记的CPSA抗体    1瓶（6ml）    1瓶（3.0ml）    即用型
亲和链酶素-HRP    1瓶（10ml）    1瓶（5.0ml）    即用型
洗涤缓冲液    1瓶（20ml）    1瓶（10ml）    按说明书进行稀释
底物A    1瓶（6.0ml）    1瓶（3.0ml）    即用型
底物B    1瓶（6.0ml）    1瓶（3.0ml）    即用型
终止液    1瓶（6.0ml）    1瓶（3.0ml）    即用型

人复合前列腺特异性抗原(CPSA)ELISA试剂盒自备材料
1．  蒸馏水。
2．  加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
3．  振荡器及磁力搅拌器等。

安全性
1．  避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。
2．  实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3．  不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

人复合前列腺特异性抗原(CPSA)ELISA试剂盒操作注意事项
1．  试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
2．  实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
3．  不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
4．  使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。
5．  使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6．  洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7．  底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。

试剂盒性能
1. 灵敏度：最小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
2. 特异性：不与人其它细胞因子反应。
3. 重复性：板内、板间变异系数均小于10%。

结果 判 断 与 分 析
1、仪器值：于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值
2、以吸光度OD值为纵坐标（Y），相应的AIRA标准品浓度为横坐标（X），做得相应的曲线，样品的AIRA含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。
3、检测值范围：0-400pg/ml
4、敏感度： 1.0pg/ml