药敏试验方法：

K-B法：
1 从孵育了16-24小时的琼脂平板上（血平板），挑出单个菌落，直接用生理盐水制成0.5麦氏单位。
2 在15分钟内，用无菌棉拭子蘸取调好的菌液，在液面上方管壁处旋转并用力挤压几次，以从中挤出过多的菌液。
3 用棉拭子在无菌的M-H培养基表面化线接种，再重复操作两次，每次将平板转动60度，每次接种都应保证接种物均匀分布，最后用棉拭子涂抹平板的边缘。
4 将确定好的药敏纸片分贴到平板表面。每个纸片都应压一下，以保证与平板表面完全接触。每个纸片中心间距24mm。纸片一旦与平板接触，不应再移动。
5 贴完纸片后，应在15分钟内放入35度孵箱。嗜血杆菌属，链球菌属放入3%-5%的CO2烛缸。
6 孵育24小时以后，测量各药敏纸片抑菌圈直径，与NCCLS手册比较，作出结果判断。 
说明：细菌药敏结果的判断以NCCLS为标准，所以药敏试验的每一步都应严格按照NCCLS操作，否则将失去意义。链球菌、奈瑟菌属、流感嗜血杆菌、除铜绿假单孢菌和不动杆菌外的假单孢菌属不用K-B法.                        

肺炎链球菌胶乳凝集测定法

1 在一干净玻片上分别滴两滴生理盐水。
2 从冰箱取出鉴定试剂(Slidex pneumo-kit)于室温。
3.在其中一滴生理盐水上滴加R1试剂，在另外一滴上滴加R2试剂，用搅拌棒混匀。
4 轻轻晃动玻片2分钟，观察结果。
5 2分钟内，如R1出现凝集为阳性；如R1和R2均未出现凝集为阴性。
注：R3为阳性对照。

药敏纸片的选择

1、革兰阴性杆菌（肠杆菌科）
头孢噻肟（CTX）头孢唑林（CZ）头孢他定（CAZ）
氨苄西林（AM） 哌拉西林（PIP）阿米卡星（AN）
头孢噻吩（CF）环丙沙星（CIP）头孢呋辛（CXM）
庆大霉素（GM）头孢噻肟/棒酸（CTX/CA）
头孢他定/克拉维酸（CAZ/CA）羧苄青霉素（CB）
奥格门丁（AMX/CA）哌拉西林/三唑巴坦（PIP/TZ）
亚安培南 头孢匹肟（FEP） 头孢克罗（CEC）

2、铜绿假单孢菌/不动杆菌
妥布霉素（TM）阿米卡星（AN）安曲南（AZT）
头孢哌酮（CFP）哌拉西林（PIP）头孢匹肟
头孢噻肟（CTX）环丙沙星（CIP）头孢他定（CAZ）
左旋氧氟沙星（OFL）亚安培南 哌拉西林/三唑巴坦

3、金黄色葡萄球菌
苯唑西林（OX）青霉素G（P）头孢唑林（CZ）阿米卡星（AN）
红霉素（E）头孢噻肟（CTX）环丙沙星（CIP）
万古霉素 奥格门丁（AMX/CA）哌拉西林/三唑巴坦
头孢噻吩（CF） 

4 、肠球菌
氨苄西林（AM）万古霉素 环丙沙星（CIP）
庆大霉素（GM）红霉素（E） 氧氟沙星（OFL）

5、除肺炎链球菌外链球菌
氨苄西林（AM）头孢噻肟（CTX）万古霉素
红霉素（E） 氧氟沙星（OFL）克林霉素(CM)
肺炎克雷伯菌产酸克雷伯菌和大肠杆菌ESBLs的检测
MH培养基上贴头孢他定，头孢他定/克拉维酸，头孢噻肟/棒酸，安曲南。