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胃蛋白酶水溶液(0.4%)的操作步骤
人阅读 发布时间:2018-08-01 13:36
在热诱导抗原修复法出现之前,胰蛋白酶、蛋白酶K、胃蛋白酶等酶类的诱导的表位修复是最常用的方法。Leagene 胃蛋白酶水溶液(0.4%)能暴露石蜡切片等样品中的抗原表位,从而大大改善免疫染色效果。通常石蜡切片都需进行抗原修复处理,而冰冻切片可以不进行抗原修复处理,抗原修复可以提高石蜡切片的免疫染色效果,亦可以不同程度的提高冰冻切片的染色效果,按照每个片子需要10ml抗原修复液(1×)计算,100ml抗原修复液可以用于10个样本的抗原修复。
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在热诱导抗原修复法出现之前,胰蛋白酶、蛋白酶K、胃蛋白酶等酶类的诱导的表位修复是最常用的方法。Leagene 胃蛋白酶水溶液(0.4%)能暴露石蜡切片等样品中的抗原表位,从而大大改善免疫染色效果。通常石蜡切片都需进行抗原修复处理,而冰冻切片可以不进行抗原修复处理,抗原修复可以提高石蜡切片的免疫染色效果,亦可以不同程度的提高冰冻切片的染色效果,按照每个片子需要10ml抗原修复液(1×)计算,100ml抗原修复液可以用于10个样本的抗原修复。
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在热诱导抗原修复法出现之前,胰蛋白酶、蛋白酶K、胃蛋白酶等酶类的诱导的表位修复是最常用的方法。Leagene 胃蛋白酶水溶液(0.4%)能暴露石蜡切片等样品中的抗原表位,从而大大改善免疫染色效果。通常石蜡切片都需进行抗原修复处理,而冰冻切片可以不进行抗原修复处理,抗原修复可以提高石蜡切片的免疫染色效果,亦可以不同程度的提高冰冻切片的染色效果,按照每个片子需要10ml抗原修复液(1×)计算,100ml抗原修复液可以用于10个样本的抗原修复。
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(一)石蜡切片
1、脱蜡至水
①二甲苯3次,每次3~5min。
②无水乙醇脱水2次,每次3~5min。
③95%的乙醇,3~5min。
④90%的乙醇,3~5min。
⑤80%的乙醇,3~5min。
⑥70%的乙醇,3~5min。
⑦蒸馏水冲洗2次,每次3~5min。
2、抗原修复:将切片浸泡在胃蛋白酶水溶液(0.4%)中,37℃孵育。
3、免疫染色洗涤液或自来水洗涤1~2次,彻底漂洗干净。
4、进行后续的免疫染色步骤。
(二)冰冻切片:
1、免疫染色洗涤液或自来水洗涤切片。
2、抗原修复:将切片浸泡在胃蛋白酶水溶液(0.4%)中孵育。
3、免疫染色洗涤液或自来水洗涤1~2次,彻底漂洗干净。
5、进行后续的免疫染色步骤。