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培养基ph调整的注意事项

人阅读 发布时间:2023-05-25 09:52

测定培养基pH的最准确的方法是使用pH计,使用前必须用已知pH的(通常pH为4-7)标准缓冲溶液进行校准。将pH计的电极用蒸馏水冲洗后浸入到烧杯的培养基中,就可以从pH计的刻度读出培养基的pH。每个生产厂商对每种不同pH计都提供有详细的操作说明。接下来远慕为大家详细解答。

配制培养基时,使用带机械搅拌的pH计可以很容易地调整pH。

培养基位在能够不停搅拌的容器(如大烧杯)中配制,使用磁力搅拌器,磁力搅拌器带有聚乙/烯或聚四氟乙/烯包装的磁棒。含琼脂的培养基需在融化后调整其pH,用可加热的磁力搅拌器很容易办到。调节pH时用已知pH的标准缓冲液溶液先对pH计进行校准。然后将复合电极和电阻温度计(如果有)置于培养基,从烧杯远离电极的一端缓慢加人适量的盐酸和氢氧/化钠,保到培养基达到并保持所需的pH。

pH计的温度补偿应考虑到温度对电极系统的影响:在一些稀释液和培养基中,pH随温度的变化而有相当大的变化。对于液体培养基和稀释液而言,通常既可以在25℃下,也可以在其使用时的温度下调整和测定。

琼脂培养基必须在溶解后进行pH的调整,溶解的温度在45℃以上。因此,固体培养基应在其使用温度确定pH。这时应使用平头的复合电极,同时用手动校准pH计的温度补偿。在制备培养基时,若测定出培养基在熔化状态和凝固状态的pH有所不同时,说明在调整pH产生误差。

同样,制备的培养基在加热灭菌处理(如高压灭菌〉时,也可能会产生pH的变化。对于脱水培养基,生产厂商己考虑到这一点,通常不谣要再调整其pH。但应认真核对待用培养基的pH。如果脱水的琼脂培养基在再次溶解或制备的过程中必须调整pH,那么在灭菌操作步骤之后用过滤灭菌的盐酸和氢氧/化钠溶液进行调整,以避免造成因再次灭菌而形成的培养基的过度加热。当用不同的原枓或药品制备培养基时,必须在高压灭菌后检测培养基的pH。此外,如果发现培养基的在每次高压灭菌后都发生相同变化,可在配制培养基时对pH进行适当调整。但仍需测定培养基灭菌后的最终pH。

测定培养基pH的*准确的方法是使用pH计,使用前必须用已知pH的(通常pH为4-7)标准缓冲溶液进行校准。将pH计的电极用蒸馏水冲洗后浸入到烧杯的培养基中,就可以从pH计的刻度读出培养基的pH。每个生产厂商对每种不同pH计都提供有详细的操作说明。

配制培养基时,使用带机械搅拌的pH计可以很容易地调整pH。

培养基位在能够不停搅拌的容器(如大烧杯)中配制,使用磁力搅拌器,磁力搅拌器带有聚乙/烯或聚四氟乙/烯包装的磁棒。含琼脂的培养基需在融化后调整其pH,用可加热的磁力搅拌器很容易办到。调节pH时用已知pH的标准缓冲液溶液先对pH计进行校准。然后将复合电极和电阻温度计(如果有)置于培养基,从烧杯远离电极的一端缓慢加人适量的盐酸和氢氧/化钠,保到培养基达到并保持所需的pH。

pH计的温度补偿应考虑到温度对电极系统的影响:在一些稀释液和培养基中,pH随温度的变化而有相当大的变化。对于液体培养基和稀释液而言,通常既可以在25℃下,也可以在其使用时的温度下调整和测定。

琼脂培养基必须在溶解后进行pH的调整,溶解的温度在45℃以上。因此,固体培养基应在其使用温度确定pH。这时应使用平头的复合电极,同时用手动校准pH计的温度补偿。在制备培养基时,若测定出培养基在熔化状态和凝固状态的pH有所不同时,说明在调整pH产生误差。

同样,制备的培养基在加热灭菌处理(如高压灭菌〉时,也可能会产生pH的变化。对于脱水培养基,生产厂商己考虑到这一点,通常不谣要再调整其pH。但应认真核对待用培养基的pH。如果脱水的琼脂培养基在再次溶解或制备的过程中必须调整pH,那么在灭菌操作步骤之后用过滤灭菌的盐酸和氢氧/化钠溶液进行调整,以避免造成因再次灭菌而形成的培养基的过度加热。当用不同的原枓或药品制备培养基时,必须在高压灭菌后检测培养基的pH。此外,如果发现培养基的在每次高压灭菌后都发生相同变化,可在配制培养基时对pH进行适当调整。但仍需测定培养基灭菌后的最终pH。

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