动物细胞培养的培养步骤介绍

　　动物细胞培养的必需条件
　　
　　在所有的细胞离体培养中，最困难的是动物细胞培养。下面是它所需要的特殊条件。
　　
　　⑴血清：动物细胞离体培养常常需要血清。最常用的是小牛血清。血清提供生长必需因子，如激素、微量元素、矿物质和脂肪。在这里，血清等于是动物细胞离体培养的天然营养液。
　　
　　⑵支持物：大多数动物细胞有贴壁生长的习惯。离体培养常用玻璃，塑料等作为支持物。
　　
　　⑶气体交换：二氧化碳和氧气的比例要在细胞培养过程中不断进行调节，不断维持所需要的气体条件。
　　
　　动物细胞培养的培养步骤
　　
　　注：所有步骤应在无菌无毒的超净工作台进行。胰蛋白酶处理时间不宜过长。
　　
　　取离体的动物组织，器官或细胞，剪碎并加入胰蛋白酶分解成单个细胞，配置形成细胞悬液。
　　
　　制备动物细胞培养液体培养基（需加入血清，保证无菌无毒），将细胞接种至培养基，放入二氧化碳培养箱中进行初代培养。
　　
　　当细胞增殖达到一定程度，出现接触抑制现象时，用胰蛋白酶再次处理，并用细胞悬液吹打贴壁生长的细胞。进行细胞计数。
　　
　　依照计数结果，分瓶培养，进行传代培养。获得细胞系或细胞株。