糖原D-PAS染色液(淀粉酶消化法)操作步骤

中文名称：糖原D-PAS染色液(淀粉酶消化法)
产品规格：5×50mL/×100mL
保存：4℃避光，12个月
分类：碳水染色
用途：区分黏蛋白和多糖
注意事项：普通PAS染色法无法准确鉴别黏液物质(如黏液物质或多糖),本染色液在PAS染色之前有糖原消化步骤,需要做阳性对照。结果为：淀粉酶处理的片子糖原阴性,而对照呈红色或红紫色。

简介：糖原染色是病理学中常规的染色方法之一，McManus在1946年蕞先使用高碘酸-雪夫技术显示黏蛋白，该法常用来显示糖原和其他多糖，该染色试剂盒不仅能够显示糖原，还能显示中性黏液性物质和某些酸性物质以及软骨、垂体、霉菌、真菌、色素、淀粉样物质、基底膜等。糖原D-PAS染色液的特点在于糖原PAS染色之前经淀粉酶处理，糖原消化时需要两张相同的切片，脱蜡后一张切片用含有淀粉酶的适当缓冲液处理，另一张仅用缓冲液处理。然后两张切片均用PAS法染色，消化后染色消失表明存在糖原


操作步骤(仅供参考)：
1、两张相同切片，二甲苯脱蜡，梯度乙醇入水。
2、一张切片入37℃淀粉酶溶液处理1h。
3、流水冲洗两张切片各5～10min。
4、入过碘酸溶液，室温放置。
5、自来水冲洗1次，再用蒸馏水浸洗2次。
6、入SchiffReagent，置于室温阴暗处浸染。
7、自来水冲洗10min。
8、入Mayer苏木素染色液染细胞核。
9、(可选)酸性乙醇分化液分化。10、自来水冲洗，更换蒸馏水清洗使其返蓝。
11、二甲苯透明，中性树胶封固。


染色结果：
糖原、中性，唾液黏蛋白   红紫色
各种糖蛋白    红紫色
未处理的切片，糖原呈亮红色或红紫色；淀粉酶处理的切片，糖原阴性。

注意事项：
1、切片脱蜡应尽量干净，否则影响染色效果。需使用一张阳性对照片验证酶的活性。
2、过碘酸氧化时间不宜过久，氧化时温度以18～22℃蕞佳。
3、酸性乙醇分化液应经常更换新液，其分化时间应该依据切片厚薄、组织的类别和酸性乙醇分化液的新旧而定。
4、在过碘酸溶液和SchiffReagent中作用时间非常重要，该依据切片厚薄、组织类别等决定。