基底膜六胺银染色液(PASM)实验步骤

中文名称: 基底膜六胺银染色液(PASM)
分类：碳水染色
规格：6×50ml
储存条件：4℃,避光,3个月
用途：基底膜粘多糖染色，又叫PASM染色（periodic acid-silver methenamine）。
注意事项：肾小球囊基底膜、毛细血管球基底膜、网状纤维和Ⅳ型胶原纤维呈黑色,背景呈绿色（用HE复染，核呈蓝色，背景呈红色）。主要由过碘酸、铁明矾、六胺银工作液、氯化金、淡绿等染色液组成。



产品说明：基底膜六胺银(methenaminesilver)染色是一种经典显示基底膜的方法。组织经过氧化，使基底膜内的黏多糖暴露出醛基，醛基把六胺银还原为黑色的金属银。氯化金可使金属银转变为更稳定的金属金，同时使背景更清晰。六胺银染色能清晰地显示基底膜，在肾病变中应用最多，常用来观察肾小球毛细血管基底膜在炎性损伤时如断裂、增生、折叠等形态改变。

操作步骤(仅供参考)：
1.切片脱蜡至水洗。
2.切片入氧化剂氧化15min。
3.自来水洗、蒸馏水洗2min。
4.入铁明矾溶液染色10min。
5.自来水洗、蒸馏水洗2min。
6.入配制好的六胺银工作液中，60℃水浴染色大约25～30min，切片呈烟草黄色或黑色为止。
7.入蒸馏水中清洗。
8.用氯化金溶液调色1～2min。
9.蒸馏水洗2min。
10.置于海波溶液1min。
11.自来水洗。
12.用淡绿溶液复染1min。
13.自来水洗。
14.95%乙醇开始脱水，二甲苯透明，中性树胶封封固。

染色结果：
肾小球囊基底膜、肾毛细血管球基底膜  黑色
背景  绿色

注意事项：
1.实验中所用玻璃器皿，应预先放入洗液浸泡过并冲洗干净，烤干。
2.六胺银工作液配制后可放入温箱中预热3-5min（选做）。
3.配制好的六胺银工作液是一次性的，不能久放。
4.氯化金调色时，一定要在显微镜下观察。
5.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。