1　称取新鲜除脂肪和筋膜的碎牛肉500g，加蒸馏水1000mL和1mol/L氢氧化钠溶液25mL，搅拌煮沸15min，充分冷却，除去表层脂肪，澄清，过滤，加水补足至1000mL。加入除碎肉渣外的各种成分，校正pH。

2　碎肉渣经水洗后晾至半干，分装15mm×150mm试管约2～3cm高，每管加入还原铁粉0.1～0.2g或铁屑少许。将上述液体培养基分装至每管内超过肉渣表面约1cm。上面覆盖溶化的凡士林或液体石蜡0.3～0.4cm。121℃高压灭菌15min。

庖肉培养基（用于培养和保藏厌氧菌）

（1）去膘牛肉：取已去筋膜、脂肪的牛肉500g，切成黄豆大小的颗粒，放入盛有1000ml蒸馏水的烧杯中，用文火煮沸约1h。

（2）过滤：用纱布过滤后取若干牛肉渣粒装入亨盖特滚管或普通试管，装量达15mm左右的高度。在于试管中加入PH7.4~7.6的牛肉膏蛋白胨液体培养基10~12ml，最后塞上黑色异丁基橡胶塞。

（3）灭菌：在异丁基橡胶塞上插1枚注射器针头，放入灭菌锅内，于121℃下灭菌20min。灭菌后立即拔去针头，并塞紧管塞。若以无氧法分装成的无氧培养基的亨盖特滚管，则可免插注射器针头，但要将各滚管塞压紧后再进行灭菌，这样制备成的滚管称为PRAS培养基（或称为预还原性厌氧无菌培养基），使用前也不必驱氧，但需无氧无菌操作法转移或接种。

（4）使用前除氧：若厌氧培养基在存放中有氧气渗入，使用前置水浴中煮沸10min，以除去溶入的氧，在高纯氮气饱和下冷却后避氧无菌操作接种。